ИЗУЧЕНИЕ ЧИСЛА КОПИЙ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНК В ООЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА С РАЗЛИЧНЫМИ МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ АНОМАЛИЯМИ

DOI: https://doi.org/None

А.Г. Сыркашева (1), кандидат медицинских наук, А.М. Красный (1), кандидат биологических наук, Т.Д. Майорова (2), кандидат биологических наук, Н.П. Макарова (1), кандидат биологических наук, Н.В. Долгушина (1), доктор медицинских наук 1 -Научный Центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова Минздрава России, Российская Федерация, 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4; 2 -Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова Российской академии наук, Российская Федерация, 119071, Москва, ул. Вавилова, д. 26 E-mail: anast.syrkasheva@gmail.com

Введение. В циклах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) около 70% ооцитов, полученных при экзогенной стимуляции суперовуляции, имеют аномалии строения (дисморфизмы). Нарушения процессов накопления энергии в клетке вследствие дезорганизации работы митохондрий могут быть одним из возможных патогенетических механизмов пониженного потенциала развития эмбрионов, полученных при оплодотворении ооцитов с дисморфизмами. Цель. Провести сравнительный анализ числа копий митохондриальной ДНК (мтДНК) в ооцитах человека в зависимости от наличия и вида дисморфизмов. Материал и методы. У 198 женщин были отобраны 343 ооцита, не оплодотворившихся в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Ооциты с цитоплазматическими дисморфизмами составили 1-ю группу (n=126), с экстрацитоплазматическими дисморфизмами – 2-ю группу (n=108), ооциты без дисморфизмов – 3-ю группу (n=109). Исследование числа копий мтДНК в ооцитах проводили методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. Результаты. Распределение числа копий мтДНК ооцитов находилось в диапазоне от 5’440 до 9’800’000 копий. Медиана распределения составила 2’000’000 с интерквартильным размахом от 813’000 до 3’300’000 копий. В 1-й группе медиана мтДНК с интерквартильным размахом составила 1’300’000 (263’500–2’325’000) копий, во 2-й группе – 2’000’000 (1’350’000–4’150’000) копий, в 3-й группе – 2’500’000 (1’400’000–4’000’000) копий (p
Ключевые слова: 
качество ооцитов, дисморфизмы ооцитов, митохондрии, митохондриальная ДНК, экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО)

Список литературы: 
  1. Van Blerkom J. Mitochondrial function in the human oocyte and embryo and their role in developmental competence. Mito-chondrion. 2011; 11 (5): 797–813.
  2. Sutovsky P., Van Leyen K., McCauley T., Day B., Sutovsky M. Degradation of paternal mitochondria after fertilization: implications for heteroplasmy, assisted reproductive technologies and mtDNA inheritance. Reprod Biomed Online. 2004; 8 (1): 24–33.
  3. St. John J., Facucho-Oliveira J., Jiang Y., Kelly R., Salah R. Mitochondrial DNA transmission, replication and inheritance: A journey from the gamete through the embryo and into offspring and embryonic stem cells. Hum Reprod Update. 2010; 16 (5): 488–509.
  4. Morgan C., Jean M., Savagner F., Reynier P., Chre M., Barrie P. Mitochondrial DNA content affects the fertilizability of human oocytes. Mol Hum Reprod. 2001; 7 (5): 425–9.
  5. Ubaldi F., Rienzi L. Morphological selection of gametes. Placenta. 2008; 29 (Suppl B): 115–20.
  6. Ten J., Mendiola J., De Juan J., Bernabeu R. Donor oocyte dysmorphisms and their influ-ence on fertilization and embryo quality. Reprod Biomed Online. 2007; 14: 40–8.
  7. Rienzi L., Ubaldi F., Iacobelli M., Minasi M., Romano S., Ferrero S., Sapienza F., Baroni E., Litwicka K., Greco E. Significance of metaphase II human oocyte morphology on ICSI outcome. Fertil Steril. 2008; 90 (5): 1692–700
  8. Wilding M., Matteo L., Andretti S., Montan-aro N., Capobianco C., Dale B. An oocyte score for use in assisted reproduction. J. Assist Reprod Genet. 2007; 350–8.
  9. Fancsovits P., Tóthné Z., Murber Á., Rigó J., Urbancsek J. Importance of cytoplasmic granularity of human oocytes in in vitro fer-tilization treatments. Acta Biol Hung. 2012; 63 (2): 189–201.
  10. Nottola S., Macchiarelli G., Coticchio G., Bianchi S., Cecconi S., Santis L., Scaravelli G., Flamigni C., Borini A. Ultrastructure of human mature oocytes after slow cooling cryopreservation using different sucrose concentrations. Hum Reprod. 2007; 22 (4): 1123–33.
  11. Ebner T., Moser M., Shebl O., Sommergruber M., Tews G. Prognosis of oocytes show-ing aggregation of smooth endoplasmic reticulum. Reprod Biomed Online. 2008; 16: 113–8.
  12. Otsuki J., Okada A., Morimoto K., Nagai Y., Kubo H. The relationship between preg-nancy outcome and smooth endoplasmic reticulum clusters in MII human oocytes. Hum Reprod. 2004; 19 (7): 1591–7.
  13. Lasiene K., Vitkus A., Valanciute A., Lasys V. Morphological criteria of oocyte quality. Medicina (Kaunas). 2009; 45 (7): 509–15.
  14. Van Blerkom J., Davis P., Lee J. ATP content of human oocytes and developmental potential and outcome after in-vitro ferti-lization and embryo transfer. Hum Reprod. 1995; 10: 415–24.
  15. Kahraman S., Yakin K., Dönmez E., Samli H., Bahçe M., Cengiz G, Sertyel S., Samli N., Imirzalioglu N. Relationship between granu-lar cytoplasm of oocytes and pregnancy outcome following intracytoplasmic sperm injection. Hum Reprod. 2000; 15 (11): 2390–3.
  16. Ebner T., Moser M., Sommergruber M. Occurrence and developmental conse-quences of vacuoles throughout preim-plantation development. Fertil Steril. 2005; 83 (6): 1635–40.
  17. Otsuki J., Nagai Y., Chiba K. Lipofuscin bodies in human oocytes as an indicator of oocyte quality. J. Assist Reprod Genet. 2007; 24 (7): 263–70.
  18. Ramalho-Santos J., Varum S., Amaral S., Mota P., Sousa A., Amaral A. Mitochondrial functionality in reproduction: From gonads and gametes to embryos and embryonic stem cells. Hum Reprod Update. 2009; 15 (5): 553–72.
  19. Manfredi G., Thyagarajan D., Papadopou-lou L., Pallotti F., Schon E. The fate of human sperm-derived mtDNA in somatic cells. Am. J. Hum Genet. 1997; 61: 953–60.
  20. Agarwal A., Gupta S., Sharma R. Role of oxidative stress in female reproduction. Reprod Biol Endocrinol. 2005; 3: 28.
  21. Steuerwald N., Barritt J., Adler R., Malter H., Schimmel T., Brenner C. Quantification of mtDNA in single oocytes, polar bodies and subcellular components by real-time rapid cycle fluorescence monitored PCR. Zygote. 2000; 9: 209–15.
  22. Agarwal A., Said T., Bedaiwy M., Banerjee J., Alvarez J. Oxidative stress in an assisted reproductive techniques setting. Fertil Steril. 2006; 86 (3): 503–12.