ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ИНТЕРФЕРОНОВ В КУЛЬТУРЕ ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ И ПРИ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

DOI: https://doi.org/None

О.И. Конюшко (1), кандидат биологических наук, С.В. Ожерелков (1), доктор биологических наук, Е.В. Хитрина (1), кандидат биологических наук, А.В. Саличев (1), Т.Н. Кожевникова (2), кандидат медицинских наук, А.В. Санин (2), доктор биологических наук, профессор 1 -Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова, Российская Федерация, 142782, Москва, поселение Московский, пос. Институт полиомиелита, 27-й км Киевского шоссе; 2 -Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России, Российская Федерация, 123098, Москва, ул. Гамалеи, 18 Е-mail: institute@poliomyelit.ru

Введение. Линии диплоидных клеток человека (ЛДКЧ) широко применяют в диагностической вирусологии и экспериментальных исследованиях. Одним из направлений использования ЛДКЧ в вирусологии и иммунологии является создание на их основе тест-системы для определения активности интерферона (IFN) человека. Цель. Охарактеризовать особенности линий диплоидных фибробластов человека в отношении экспрессии генов (IFN) и их продукции в норме, при воздействии иммуномодуляторов и при вирусной инфекции. Результаты. Полученные данные показывают, что ЛДКЧ являются хорошим субстратом для размножения вируса везикулярного стоматита, что, в свою очередь, обосновывает их использование для тестирования сывороточного IFN. В настоящем исследовании охарактеризованы линии ЛДКЧ в отношении экспрессии генов IFNα/β, γ и хемокина IP-10 при стимуляции 2 иммуномодуляторами, обладающими противовирусной и интефероногенной активностью. Показано, что в ЛДКЧ регистрируется спонтанная стимуляция м-РНК хемокина IP-10, индуцируемого IFNγ. При этом экспрессия гена IP-10 значительно увеличивается при обработке клеток экзогенным IFNα и ПГ. Заключение. Полученные данные убедительно свидетельствуют о том, что ЛДКЧ могут использоваться в качестве тестсистемы для изучения механизмов действия иммуномодуляторов и противовирусных препаратов.
Ключевые слова: 
линии диплоидных клеток человека, вирус везикулярного стоматита, интерфероны, полипренилфосфаты, экспрессия генов
Для цитирования: 
Конюшко О.И., Ожерелков С.В., Хитрина Е.В., Саличев А.В., Кожевникова Т.Н., Санин А.В. ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ ИНТЕРФЕРОНОВ В КУЛЬТУРЕ ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ И ПРИ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ. Молекулярная медицина, 2016; (5): -

Список литературы: 
  1. Aaby P., Samb B, Simondon F. et al. Divergent mortality for male and female recipients of low-titer and high-titer measeles vaccines in rural Senegal. Amer. J. Epidemiol. 1993; 138: 756–65
  2. Fishbein D., Dreesen D., Holmes D. et al. Human diploid cell rabies vaccine purified by zonal centrifugation: a controlled study of antibody response and side effects fol-lowing primary and booster pre-exposure immunizations. Vaccine. 1989; 7: 437–42.
  3. Gluck R., Yoskins J., Wegmann A. et al. Rubini, a new live attenuated mumps vaccine virus strain for human diploid cells. In: Use and Standardization of Combined Vaccines (Wezel van A., Hennessen W., eds.). Dev. Biol. Stand. 1986; 65: 29–35.
  4. Hayflick L., Plotkin S., Norton T., Koprowski H. Preparanion of poliovirus vaccines in a hu-man fetal diploid cell strain. Amer. J. Hyg. 1962; 75: 240–58.
  5. Peetermans J. Production, quality control and characterization of an inactivated hepatitis A vaccine. Vaccine. 1992; 10: 99–101.
  6. Plotkin S., Cornfeld D., Ingalls T. Stadies of immunization with living rubella virus: trials in children with a strain cultured from an aborted fetus. Amer. J. Dis. Child. 1965; 110: 381–9.
  7. Серия технических докладов ВОЗ. М.: Медицина, 1988; 747.[WHO Technical Report Series. M.: Medicina, 1988; 747 (in Russian)]
  8. Шалунова Н.В., Ломанова Г.А. Методические указания по аттестации перевиваемых клеточных линий – субстратов производства и контроля медицинских иммунобиологических препаратов. М.: Мз СССР, 1989; 46.[Shalunova N.V., Lomanova G.A. Meth-odological guidelines for certification of transplantable cell lines for the purpose of production and control of medical im-munobiological preparations. M.: Mz USSR, 1989; 46 (in Russian)]
  9. Миронова Л.Л., Попова В.Д, Конюшко О.И., Хапчаев Ю.Х., Зыбин Д.В., Акопян А.С. Опыт создания банка авторских линий перевиваемых клеток и их применение в вирусологической практике. Биотехнология. 2000; 6: 41–7.[Mironova L.L., Popova V.D., Konyushko O.I., Hapchaev Ju.H., Zybin D.V., Akopjan A.S. Creation of the original transplantable cell lines bank and their application in the virology practice. Biotechnology. 2000; 6: 41–7 (in Russian)]
  10. Конюшко О.И., Подчерняева Р.Я., Сургучева И.М., Миронова Л.Л., Мезенцева М.В. Сравнительная характеристика диплоидных клеток кожи и мышц эмбриона человека по способности синтезировать мРНК цитокинов. Сб.: ИНТЕРФЕРОНУ – 50 ЛЕТ. Материалы конференции, Москва, 19–20 ноября 2007; 202–4. [Konyushko O.I., Podchernjaeva R.Ja., Surgucheva I.M., Mironova L.L., Mezenceva M.V. Comparative characteristics of diploid cells of the skin and muscles of the human embryo judging by their ability to synthe-size mRNA of cytokines. In: INTERFERON – 50 YEARS. The materials of the conference Moscow, 19–20 November 2007; 202–4 (in Russian)]
  11. Леннет Э., Шмидт Н. Лабораторная диагностика вирусных и риккетсиозных заболеваний. М.: Медицина, 1974; 42–6.[Lennet Je., Shmidt N. Laboratory diagnosis of viral and rickettsial diseases. M.: Me-dicina, 1974; 42–6 (in Russian)]
  12. Helmut Brade et al., eds. Endotoxin in Health and Disease, New York: Marcel Dekker, 1999.
  13. Васильев А.Н., Ожерелков С.В., Козлов В.В., Пронин А.В., Санин А.В., Парфенова Т.М., Изместьева А.В., Амченкова А.М., Кожевникова Т.Н., Степанова Т.Н., Наровлянский А.Н. Противовирусная и иммуномодулирующая активность полипренилфосфатов при вирусных инфекциях. Антибиотики и химиотерапия. 2008; 53 (3–4): 3–8.[Vasiliev A.N., Ozherelkov S.V., Kozlov V.V., Pronin A.V., Sanin A.V., Parfjonova T.M., Izmestieva A.V., Amchenkova A.M., Kozhevnikova T.N., Stepanova T.N., Narovl-jansky A.N. Antiviral and immunomodulat-ing activity polyprenyl phosphatis in viral infections. Antibiotics and chemotherapy. 2008; 53 (3–4): 3–8 (in Russian)]
  14. Изместьева А.В., Саличев А.В., Мезенцева М.В., Березина Л.К., Ольшанская А.А., Амченкова А.М., Зубашев И.К., Козлов В.С., Ожерелков С.В., Пронин А.В., Санин А.В., Наровлянский А.Н. Иммуномодулирующая и противовирусная активность морапренилфосфатов (МПФ). СпБ 2011 Мед. иммунол. 2011; 13 (4–5): 522–3.[Izmestieva A.V., Salichev A.V., Mezenceva M.V., Berezina L.K., Ol’shanskaja A.A., Amchenkova A.M., Zubashev I.K., Kozlov V.S., Ozherelkov S.V., Pronin A.V., Sanin A.V., Narovljansky A.N. Immunomodulatory and antiviral activity moraprenil phosphatis (MPPh). SpB 2011 Med. immunol. 2011; 13 (4–5): 522–3 (in Russian)]
  15. Ожерелков С.В., Белоусова Р.В., Данилов Л.Л., Деева А.В., Наровлянский А.Н., Санин А.В., Пронин А.В.. Препарат фоспренил подавляет размножение вирусов диареи и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота в чувствительных культурах клеток. Вопр. вирусол. 2001; 5: 43–5.[Ozherelkov S.V., Belousova R.V., Danilov L.L., Deeva A.V., Narovljansky A.N., Sanin A.V., Pronin A.V. The drug Phosprenyl inhibits the multiplication of diarrhea virus and infectious bovine rhinotracheitis virus in cattle in sensitive cell cultures. Vopr. virusol. 2001; 5: 43–5 (in Russian)]
  16. Ожерелков С.В., Тимофеев А.В., Новикова Г.П., Деева А.В., Наровлянский А.Н., Санин А.В., Пронин А.В.. Защитное действие нового противовирусного препарата фоспренил при экспериментальном клещевом энцефалите. Вопр. вирусол. 2000; 45 (1): 33–7.[Ozherelkov S.V., Timofeev A.V., Novikova, G.P., Deeva A.V., Narovlyansky A.N., Sanin A.V., Pronin A.V. Protective effect of a new antiviral drug Phosprenyl in experimental tick-borne encephalitis. Vopr. virusol. 2000; 45 (1): 33–7 (in Russian)]
  17. Кожевникова Т.Н., Викторова Е.Г., Козлов В.Г., Наровлянский А.Н., Санин А.В., Пронин А.В., Ожерелков С.В. Морапренилфосфаты подавляют размножение вируса энцефаломиелита Тейлера и накопление вирусного белка VP3 в чувствительных культурах клеток BHK-21 и P388D1. Ж. микробиол. 2007; 3: 26–30. [Kozhevnikova T. N., Viktorova E.G., Kozlov, V. G., Narovlyansky A. N., Sanin A. V., Pronin, A. V., Ozherelkov S. V. Moraprenyl phosphatis inhibit replication of Theiler encephalomyelitis virus and accumulation of viral protein VP3 in BHK-21 and P388D1 sensitive cell cultures. J. Microbiol. 2007; 3: 26–30 (in Russian)]
  18. Ожерелков С.В., Куприянов В.В., Калинина Е.С., Парфенова Т.М., Кожевникова Т.Н., Пронин А.В., Санин А.В., Наровлянский А.Н. Интерфероногенная активность вируса клещевого энцефалита и полипренилсодержащих соединений в чувствительных культурах клеток. Сб. ИНТЕРФЕРОНУ – 50 ЛЕТ. Материалы конференции, Москва, 19–20.11. 2007: 184–92.[Ozherelkov S. V., Kupriyanov V.V., Kalinina, E. C., Parfenova T. M., Kozhevnikova, T. N., Pronin, A. V., Sanin A.V. , Narovlyansky A. N. Interferonogenic activity of tick-borne en-cephalitis virus and polyprenyl-containing compounds in sensitive cell cultures. In: INTERFERON – 50 YEARS. The materials of the conference Moscow, 19–20.11. 2007: 184–92 (in Russian)]
  19. Наровлянский А.Н., Васильев А.Н., Савойская С.Л., Иванова А.М., Изместьева А.В., Данилов Л.Л., Веселовский В.В., Ожерелков С.В., Зубашев И.К., Пронин А.В, Санин А.В., Ершов Ф.И. Система изопреноидов: роль в противовирусном иммунитете. Ведомости научного центра средств медицинского применения. 2007; 3: 66–78.[Narovlyansky A.N., Vasiliev A.N., Sa-voyskaya S.L., Ivanova A.M., Izmestieva A.V., Danilov L.L., Veselovsky V.V., Ozherelk-ov S.V., Zubashev I.K., Pronin A.V., Sanin A.V., Ershov F.I. System of isoprenoids: role in antiviral immunity. Bulletin of the scientific center of medical equipment usage. 2007; 3: 66–78 (in Russian)]
  20. Наровлянский А.Н., Пронин А.В., Санин А.В., Ершов Ф.И. Полиизопреноиды и система интерферона. В сб. Фундаментальные аспекты фукционирования системы интерферона. 2011: 129–34.[Narovlyansky A.N., Pronin A.V., Sanin A.V., Ershov F.I. Polyisoprenoids and the interferon system. «In Proc. Fundamental aspects of interferon system functioning. 2011: 129–34 (in Russian)]