СОДЕРЖАНИЕ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА И УРОВЕНЬ ТРАНСКРИПТОВ ГЕНА NOS2 ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ

DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2018-04-03

Л.В. Топчиева(1), кандидат биологических наук, О.В. Балан(1), кандидат биологических наук, И.Е. Малышева(1), кандидат биологических наук, О.Ю. Барышева(2), доктор медицинских наук, профессор, И.М. Марусенко(2), доктор медицинских наук, профессор, О.А. Васькова(2) 1-ФГБУН Институт биологии Карельского научного центра РАН, Российская Федерация, 185910, Петрозаводск, ул. Пушкинская, д. 11; 2-ФГБУ ВО Петрозаводский государственный университет, Российская Федерация, 185910, Петрозаводск, пр. Ленина, д. 33 E-mail: topchieva67@mail.ru

Цель исследования – изучить влияние метотрексата, глюкокортикоидов и нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) на содержание метаболитов оксида азота (NO) в плазме крови, а также уровень транскриптов гена NOS2 в лейкоцитах периферической крови больных ревматоидным артритом (РА). Материал и методы. Использованы образцы венозной крови здоровых доноров и пациентов с РА в дебюте заболевания (до лечения) и на фоне терапии метотрексатом, преднизолоном и НПВП диклофенак как по отдельности, так и в комбинациях. Суммарный уровень нитритов и нитратов (NOx) в плазме крови определяли калориметрическим методом с использованием реактива Грисса. Уровень транскриптов гена NOS2 оценивали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. Результаты. Показано, что уровень метаболитов NO в плазме крови больных РА значительно выше, чем у здоровых людей. Терапия НПВП способствовала снижению в плазме крови уровня метаболитов NO. Наиболее эффективно в отношении снижения содержания нитритов и нитратов было совместное применение больными метотрексата и преднизолона. Содержание мРНК гена NOS2 у больных РА в дебюте заболевания было значительно больше, чем у здоровых и у пациентов, находящихся на противовоспалительной терапии. Заключение. Повышенный уровень транскриптов гена NOS2 у больных РА в дебюте заболевания свидетельствует о вовлечении индуцибельной синтазы NO в гиперпродукцию NO и в патогенез данного заболевания. Противовоспалительная терапия способствует снижению содержания NOx в плазме крови, очевидно, за счет ингибирования транскрипционной активности гена NOS2. Эффективность этого процесса зависит от фармакологических свойств используемых препаратов.
Ключевые слова: 
ревматоидный артрит, метаболиты оксида азота, индуцибельная синтаза оксида азота, экспрессия гена NOS2, противовоспалительные препараты

Список литературы: 
  1. Brennan F. M., McInnes I. B. Evidence that cytokines play a role in rheumatoid arthritis. J. Clin. Inv. 2008; 118 (11): 3537–45.
  2. Weinberg J.B., Lang T., Wilkinson W.E., Pisetsky D.S., St. Clair W. Serum, urinary, and salivary nitric oxide in rheumatoid arthritis: complexties of interpreting nitric oxide measures. Arthritis Research Thearapy. 2006; 140.
  3. Carnicer R., Crabtree M.J., Sivakumaran V., Casadei B., Kass D.A. Nitric Oxide Synthases in Heart Failure. Antioxidants and redox signaling. 2013; 18: 1078–99.
  4. Migito K., Yamasaki S., Kita M. et al. Nitric oxide protects against cultured rheumatoid synovial cells from Fas-induced apoptosis by inhibiting caspase-3. Immunology. 2001; 103 (3): 362–7.
  5. Cillero-Pastor B., Martin M.A., Arenas J., López-Armada M.J., Blanco F.J. Effect of nitric oxide on mitochondrial activity of human synovial cells. BMC Musculosceletal Disorders. 2011; 12: 42.
  6. Viera A.T., Pinho V., Lepsch L.B., Scavone C., Ribeiro I.M., Tomassini T., Ribeiro-dos-Santos R., Soares M.B., Teixeira M.M., Souza D.G. Mechanisms of the anti-inflammatory effects of the natural secosteroids physalins in a model of intestinal ischemia and reperfusin injury. British J. Pharmacology. 2005; 146: 244–51.
  7. Hou W.K., Meng L.S., Zheng F. Wen Y.R., Zhu W.H., Jiang C.S., He X.J., Zhou Y., Lu S.M. Methotrexate ameliorates pristane-induced arthritis by decreasing IFN-γ and IL-17A expressions. J. of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine and Biotechnology). 2011; 12 (1): 40–6.
  8. Малышева И.Е., Топчиева Л.В., Курбатова И., Выбач М.В., Васькова О.А., Барышева О.Ю., Волкова Т.О., Везикова Н.Н., Марусенко И.М. Экспрессия гена FOXP3 и профиль цитокинов у больных ревматоидным артритом при лечении метотрексатом. Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2015; 2: 6–10. [Malysheva I.E., Topchieva L.V., Kurbatova I., Vybach M.V., Vas’kova O.A., Barysheva O.Yu., Volkova T.O., Vezikova N.N., Marusenko I.M. Ekspressiya gena FOXP3 i profil’ tsitokinov u bol’nykh revmatoidnym artritom pri lechenii metotreksatom. Immunopatologiya, allergologiya, infektologiya. 2015; 2: 6–10 (in Russian)]
  9. Herman S., Zurgil N., Langevitz P., Ehrenfeld M., Deutsch M. Methotrexate selectively modulates Th1/Th2 balance in active rheumatoid arthritis patients. Clinical and Experimental Rheumatology. 2008; 26: 317–23.
  10. Thakur S., Baydoun A.R. Post-transcriptional divergence in the regulation of CAT-2A, CAT-2B and expression by dexamethasone in vascular smooth muscle cells. Amino Acids. 2012; 43: 667–76.
  11. Korhonen R., Lahti A., Kankaanranta H., Moilanen E. Nitric Oxide Production and Signaling in Inflammation. Current Drug Targets – Inflammation and Allergy. 2005; 4: 471–9.
  12. Метельская В.А., Гуманова Н.Г. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови. Клиническая лабораторная диагностика. 2005; 6: 15–8. [Metel’skaya V.A., Gumanova N.G. Skrining-metod opredeleniya urovnya metabolitov oksida azota v syvorotke krovi. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2005; 6: 15–8 (in Russian)]
  13. Choi J.W. Nitric oxide production is increased in patients with rheumatoid arthritis but does not correlate with laboratory parameters of disease activity. Clin. Chimica Acta. 2003; 336: 83–7.
  14. Arroul-Lammali A., Rahal F., Chetouane R., Djeraba Z., Medjeber O., Ladjouze-Rezig A., Touil-Boukoffa C. Ex vivo all-trans retinoic acid modulates NO production and regulates IL-6 effect during rheumatoid arthritis: a study in Algerian patients. Immunopharmacology and Immunotoxicology. 2017; 39 (2): 87–96.
  15. Mäki-Petäjä K.M., Cheriyan J., Booth A.D. et al. Inducible nitric oxide synthase activity is increased in patients with rheumatoid arthritis and contributes to endothelial dysfunction. Int. J. of Cardiology. 2008; 129: 399–405.
  16. Yazici D., Tuncer Ü., Uğuz A. The effect of corticosteroid therapy on cyclooxygenase 2, vascular endothelial growth factor, and inducible nitric oxide synthase expression levels in nasal polyposis. European Archives Otorhinolaryngology. 2014; 271: 1541–7.
  17. Kolli V.K., Abraham P., Rabi S. Methotrexate induced nitrosative stress may play a critical role in small intestinal damage in the rat. Archive Toxicology. 2008; 82: 763–70.
  18. Yang Y.H., Hutchinson P., Santos L.L., Morand E.F. Glucocorticoid inhibition of adjuvant arthritis synovial macrophage nitric oxide production: role of lipocortin1. Clin. Experimental Immunology. 1998; 111: 117–22.
  19. Ma Y., Li L., Shao Y., Bai X., Bai T., Huang X. Methatrexate improves perivascular adipose tissue endothelial dysfunction via activation AMPK/eNOS pathway. Mol. Med. Reports. 2017; 15: 2353–9.
  20. Barnes P.J. Anti-inflammatory actions of glucocorticoides: molecular mechanism. Clin. Science. 1998; 94: 557–72.