ЭКСПРЕССНЫЙ СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК ИЗ ЗАМОРОЖЕННОЙ КРОВИ

DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2018-05-06

Н.В. Мальцева, доктор биологических наук, А.Ш. Смирнова, А.В. Колбаско, доктор медицинских наук, профессор, А.Л. Онищенко, доктор медицинских наук, профессор, А.С. Рублевская НГИУВ – филиал ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, Российская Федерация, 654005, Новокузнецк, пр. Строителей, д. 5 E-mail: ninamaltseva2015@mail.ru

Введение. Массовое генотипирование, направленное на выявление генетических особенностей популяций, создание геномных библиотек, научные разработки, проводимые на больших выборках, требуют накопления и(или) консервации (заморозки) образцов биоматериала – источника геномной ДНК. Известные способы выделения ДНК из замороженной крови трудоемки и длительны. Цель работы. Поиск нового способа выделения геномной ДНК из замороженной крови. Материал и методы. Для выделения ДНК и последующего генотипирования методом аллельспецифической полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией результатов использованы образцы замороженной крови, стабилизированной ЭДТА, взятой в экспедиционных условиях и хранившейся при -25°С в течение нескольких лет, а также образцы свежевзятой крови пациентов, из которых одни образцы замораживали и хранили при -25°С, а другие использовали сразу – для выделения ДНК. Последнее осуществляли с помощью коммерческого реагента «ДНК-ЭКСПРЕСС-кровь» производства ООО НПФ «Литех» (Москва). Результаты. Применение нового способа выделения геномной ДНК позволяет получить достаточное ее количество из длительно хранящейся замороженной крови для проведения ПЦР. Процедура выделения ДНК сокращена по длительности и количеству этапов по сравнению с коммерческим методом. Параллельное выделение ДНК из образцов замороженной крови предлагаемым способом и из свежевзятой крови коммерческим методом позволяет получить одинаковый результат при генотипировании. Заключение. Предложен новый экспрессный способ для выделения геномной ДНК из замороженной крови.
Ключевые слова: 
ген, однонуклеотидный полиморфизм