ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ММР-1 В ПОРАЖЕННОЙ КОЖЕ ПРИ ЛОКАЛИЗОВАННОЙ СКЛЕРОДЕРМИИ

DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2019-02-04

З.А. Невозинская(5, 6), кандидат медицинских наук, А.Г. Соболева(1), кандидат биологических наук, Е.А. Климов(3, 4), доктор биологических наук, И.М. Корсунская(1, 6), доктор медицинских наук, профессор, В.В. Соболев(1, 2, 3), кандидат биологических наук 1-Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН, Российская Федерация, 119991, Москва, ул. Косыгина, д. 4; 2-ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» РАМН, Российская Федерация, 105064, Москва, Малый казенный пер., д. 5; 3-ООО «Университетская диагностическая лаборатория», Российская Федерация, 119331, Москва, просп. Вернадского, д. 29, пом. I; 4-ФГБОУ ВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», биологический факультет, Российская Федерация, 119234, Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12; 5-ФГБОУ «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Российская Федерация, 117997, Москва, ул. Островитянова, д. 1; 6ГБУЗ «Московский научно-практический центр дерматовенерологии и косметологии» ДЗМ, Российская Федерация, 119071, Москва, Ленинский проспект, д. 17 E-mail: marykor@bk.ru

Цель исследования: изучение экспрессии гена MMP-1 при выраженном развитии склеродермических изменений у пациентов с диагнозом «локализованная склеродермия». Материал и методы. В исследование включены 12 больных с установленным диагнозом локализованной склеродермии, находившихся на лечении в клинике им. В.Г. Короленко Московского научно-практического центра дерматовенерологии и косметологии. Материалом для исследования служили биоптаты из пораженных и непораженных участков кожи. В качестве контроля в работе использованы биоптаты тех же больных из непораженных участков кожи. Анализ проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (РВ) с использованием меченых флюоресцентными агентами олигонуклеотидных проб. Результаты ПЦР обработаны методом 2-ΔΔCT. Результаты. У всех пациентов был определен относительный уровень экспрессии исследуемого гена. При индивидуальном анализе установлено, что экспрессия гена MMP-1 в пораженной склеродермией коже понижена по сравнению с визуально непораженной кожей (контроль) в 4,2–20,8 раза (в среднем – в 7,6±2,6 раза). Пациенты были разделены на 2 группы: с ограниченной и с распространенной бляшечной формой. Оказалось, что у пациентов с ограниченной формой заболевания экспрессия гена MMP-1 достоверно понижена в 5,3 раза, а при распространенной форме – в 11 раз. Заключение. Проведено количественное измерение экспрессии гена металлопротеиназы-1 (ММР-1) с помощью ПЦР-РВ, в результате чего экспериментально показано уменьшение экспрессии гена в пораженной склеродермией коже по сравнению с непораженными образцами.

Список литературы: 
  1. Gabrielli A., Avvedimento E.V., Krieg T. Scleroderma. The New England J. of medicine. 2009; 360 (19): 1989–2003.
  2. Jimenez S.A., Hitraya E., Varga J. Pathogenesis of scleroderma. Collagen Rheum Dis Clin. North Am. 1996; 22: 647–74.
  3. Lovell C.R., Nicholls A.C., Duance V.C., Bailey A.J. Characterization of dermal collagen in systemic sclerosis. Br. J. Dermatol. 1979; 100: 359–69.
  4. LeRoy E.C. Increased collagen synthesis by scleroderma skin fibroblasts in vitro: a possible defect in the regulation or activation of the scleroderma fibroblast. J. Clin. Invest. 1974; 54: 880–9.
  5. Sternlicht M.D., Werb Z. How matrix metalloproteinases regulate cell behavior. Annu Rev Cell Dev Biol. 2001; 17: 463–516.
  6. Eeckhout Y., Vaes G. Further studies on the activation of procollagenase, the latent precursor of bone collagenase. Effects of lysosomal cathepsin B, plasmin and kallikrein, and spontaneous activation. Biochem J. 1977; 166: 21–31.
  7. Apte S.S., Olsen B.R., Murphy G. The gene structure of tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP)-3 and its inhibitory activities define the distinct TIMP gene family. J. Biol. Chem. 1995; 270: 14313–8.
  8. Sato S., Hayakawa I., Hasegawa M., Fujimoto M., Takehara K.. Function blocking autoantibodies against matrix metalloproteinase-1 in patients with systemic sclerosis. J. Invest Dermatol. 2003; 120: 542–7.
  9. Kulski J.K., Kenworthy W., Bellgard M., Taplin R., Okamoto K., Oka A., Mabuchi T., Ozawa A., Tamiya G., Inoko H. Gene expression profiling of Japanese psoriatic skin reveals an increased activity in molecular stress and immune response signals. J. Mol. Med. 2005; 83 (12): 964–75.
  10. Sonkoly E., Wei T., Janson P.C., Saaf A., Lundeberg L., Tengvall-Linder M., Norstedt G., Alenius H., Homey B., Scheynius A. et al. MicroRNAs: novel regulators involved in the pathogenesis of psoriasis? PloS one. 2007; 2 (7): 610.
  11. Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods (San Diego, Calif). 2001; 25 (4): 402–8.
  12. Kulski J.K., Kenworthy W., Bellgard M., Taplin R., Okamoto K., Oka A., Mabuchi T., Ozawa A., Tamiya G., Inoko H. Gene expression profiling of Japanese psoriatic skin reveals an increased activity in molecular stress and immune response signals. J. of molecular medicine (Berlin, Germany). 2005; 83 (12): 964–75.
  13. Nagase H., Woessner J.F. Matrix metalloproteinases. J. Biol. Chem. 1999; 274: 21491–2.
  14. Hijova E. Matrix metalloproteinases: their biological function and clinical implications. Bratisl. Lek. Listy. 2005; 106 (3): 127–32.
  15. Hou P., Troen T., Ovejero M.C. et al. Matrix metalloproteinase-12 (MMP-12) in osteoclasts: new lesson on the involvement of MMPs in bone resorption. Bone. 2004; 34 (1): 37–47.
  16. Melerzanov A., Lavrov A., Sakania L., Korsunskaya I., Petersen E., Sobolev V. Effects of laser radiation on MMP gene expression in keratinocytes. PRIME. 2014; 4 (3): 38–45.
  17. Соболев В.В., Саутин М.Е., Свитич О.А., Лавров А.А., Корсунская И.М. Экспрессия гена MMP-12 при псориазе и атеросклерозе. Современные проблемы дерматовенерологии, иммунологии и врачебной косметологии. 2014; 30: 35–43.
  18. Соболев В.В., Соболева А.Г., Золотаренко А.Д., Саутин М.Е., Николаев А.А., Миннибаев М.Т., Потекаев Н.Н., Корсунская И.М., Брускин С.А. Экспрессия генов матриксных металлопротеаз в коже больных псориазом. Экспериментальная и клиническая дерматокосметология. 2013; 1: 56–9.
  19. Стародубцева Н.Л., Соболев В.В., Соболева А.Г., Николаев А.А., Брускин С.А. Экспрессия генов металлопротеаз (ММР-1, ММР-1, ММР-9, ММР-12) при псориазе. Генетика. 2011; 47 (9): 1254–61.
  20. Uitto J., Bauer E.A., Eisen A.Z. Scleroderma: increased biosynthesis of triple-helical type I and type III procollagens associated with unaltered expression of collagenase by skin fibroblasts in culture. The J. of clinical investigation. 1979; 64 (4): 921–30.
  21. Birdi N., Laxer R.M., Thorner P., Fritzler M.J., Silverman E.D. Localized scleroderma progressing to systemic disease. Case report and review of the literature. Arthritis and rheumatism. 1993; 36 (3): 410–5.