- English
- Русский
РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО ВАЛЬПРОЕВОЙ КИСЛОТЫ И 1,3,4-ТИАДИАЗОЛА В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ КРЫС
DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2020-04-06
Введение. Для оценки фармакокинетических параметров новых лекарственных средств необходима разработка аналитических методов определения их содержания в биологических объектах. Цель исследования. Разработка и валидация методики высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с масс-детектированием нового производного вальпроевой кислоты и 1,3,4-тиадиазола в головном мозге крыс. Методы. Объектом исследования явился новый антиконвульсант N-(5-этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-пропилпентанамид (вальпразоламид). Определение вальпразоламида осуществляли ВЭЖХ-масс-спектрометрическим методом. Оценивали селективность, перенос пробы, линейность, правильность, прецизионность, матричный эффект, степень извлечения вальпразоламида. Результаты. Разработана методика ВЭЖХ-масс-спектрометрического определения вальпразоламида в гомогенатах головного мозга крыс (аналитическая колонка Zorbax Eclipsi plus C18 4 мкм 2,0×150 мм, температура 30°С; подвижная фаза – ацетонитрил и вода деионизированная со следующим профилем градиента: 0–1-я минута – 10% раствор ацетонитрила; 1–5-я минута – линейное повышение концентрации ацетонитрила до 90%; 5–6-я минута – изократический участок с концентрацией ацетонитрила 90%; 6–10-я минута – кондиционирование колонки 10% ацетонитрилом; скорость потока подвижной фазы – 0,6 мл/мин; объем вводимой пробы – 10 мкл; общее время элюирования – 10 мин, масс-детектирование при отрицательной поляризации). Значение MRM-перехода вальпразоламида составило m/z 254,0 → m/z 167,1. Заключение. Аналитический диапазон методики составляет 1–1000 нг/мл. Разработанная методика является селективной, точной, прецизионной и линейной, по всем параметрам соответствует требованиям по валидации биоаналитических методик.
Ключевые слова:
3
Для цитирования:
Малыгин А.С., Попов Н.С., Демидова М.А., Шатохина Н.А. РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО ВАЛЬПРОЕВОЙ КИСЛОТЫ И 1,3,4-ТИАДИАЗОЛА В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ КРЫС. Молекулярная медицина, 2020; (4): -https://doi.org/10.29296/24999490-2020-04-06
Список литературы:
- Singh A., Trevick S. The epidemiology of global epilepsy. Neurol. Clin. 2016; 34 (4): 837–47. https://doi.org/10.1016/j.ncl.2016.06.015
- Thijs R.D., Surges R., O’Brain T.J., Sander J.W. Epilepsy in adults. Lancet. 2019; 16 (393): 689–701. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(18)32596-0
- N-(5-Этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-пропилпентанамид, обладающий противоэпилептической и обезболивающей активностями. Н.К. Желтухин, М.А. Демидова, А.В. Коротконожкин, Н.С. Попов, С.Я. Скачилова, Н.П. Садчикова, А.С. Малыгин; заявитель и патентообладатель ОАО ВНЦ БАВ. 267288; заявл. 13.03.2018; опубл. 20.11.2018, Бюл. №32. 1 с. [N- (5-Etil-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2-propilpentanamid, obladayushchiy protivoepilepticheskoy i obezbolivayushchey aktivnostyami. N.K. Zheltukhin, M.A. Demidova, A.V. Korotkonozhkin, N.S.Popov, S.YA. Skachilova, N.P. Sadchikova, A.S.Malygin; zayavitel’ i patentoobladatel’ OAO VNTS BAV. 267288; zayavl. 13.03.2018; opubl. 20.11.2018, Byul. №32. 1 s. (in Russian)]
- Малыгин А.С. Оценка острой токсичности и нейротоксичности нового амидного производного вальпроевой кислоты и 1,3,4-тиадиазола. Медицина. 2019; 3: 37–46. [Malygin A.S. Evaluation of acute toxicity and neurotoxicity of a new amide derivative of valproic acid and 1,3,4-thiadiazole. Meditsina. 2019; 3: 37–46 (in Russian)]
- Миронов А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К., 2012; 944. [Mironov A.N. Guidelines for preclinical studies of drugs. M.: Grif and K., 2012; 944 (in Russian)]
- Приказ МЗ РФ от 01.04.2016 №199н «Правила надлежащей лабораторной практики».
- [Prikaz MZ RF ot 01.04.2016 №199n «Rules of Good Laboratory Practice» (in Russian)]
- Береговых В.В. Валидация аналитических методик для производителей лекарств. Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств. М.: Литтерра, 2008; 18–65. [Beregovykh V.V. Validation of analytical techniques for drug manufacturers. Typical management of a pharmaceutical manufacturing enterprise. M.: Litterra, 2008; 18–65 (in Russian)]
- Guidance for Industry: Bioanalytical method validation. US Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evolution and Research (CDER), US Government Printing Office, Washington, DC. 2001.
- Guidance on the Investigation of Bioequivalence. European Medicines Agency (EMA). Committee for Medicinal Products of Human Use (CHMP). 2010.