СНИЖЕНИЕ УРОВНЯ ЦИКЛИНЗАВИСИМОЙ КИНАЗЫ-4 В ПОПУЛЯЦИИ Ki-67-НЕГАТИВНЫХ КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ

DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2022-06-06

Е.З. Лапкина, А.Р. Есимбекова, И.С. Зинченко, Т.Г. Рукша
ФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет им. профессора
В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения Российской Федерации;
Российская Федерация, 660022, Красноярский край, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Введение. Переход пролиферирующих опухолевых клеток в фазу покоя (G0) клеточного цикла рассматривается как один из механизмов формирования лекарственной устойчивости опухолей. Цель исследования. Целью настоящей работы являлось выделение фракции G0-положительных клеток меланомы на основе метода клеточного сортинга и последующее определение в них уровня циклинзависимой киназы CDK4, ингибитора циклинзависимой киназы В1. Методы. На клетки меланомы В16 осуществляли воздействие алкилирующим агентом дакарбазин с целью индукции перехода клеток в фазу покоя клеточного цикла, G0. На основе иммуноцитохимического анализа с использованием моноклоанальных антител к Ki-67 выполнялась визуализация покоящихся клеток. Флуоресцентная сортировка клеток применялась для получения изолированной популяции покоящихся клеток, в которых на основе полимеразной цепной реакции в реальном времени оценивались уровни циклинзависимой киназы 4 и ингибитора циклинзависимой киназы В1. Результаты. При воздействии дакрабазином в клетках меланомы В16 определялось повышение уровня Ki-67-негативных, G0-позитивных клеток. Применение флуоресцентного сортинга определило, что в общей популяции клеток меланомы В16 26% клеток были Ki-67негативными. В вышеуказанной клеточной популяции определялось снижение уровня циклинзависимой киназы 4. Заключение. Воздействие на клетки меланомы алкилирующим агентом дакарбазин вызывает повышение доли покоящихся клеток, что может вносить вклад в развитие лекарственной устойчивости. Применение клеточного сортинга позволяет выделить вышеуказанную популяцию клеток. Дальнейшее исследование фенотипа покоящихся клеток необходимо для формирования целенаправленных подходов для терапевтического воздействия на покоящиеся клетки.
Ключевые слова: 
Ki-67, клеточный сортинг, покоящиеся опухолевые клетки, дормантность
Для цитирования: 
Лапкина Е.З., Есимбекова А.Р., Зинченко И.С., Рукша Т.Г. СНИЖЕНИЕ УРОВНЯ ЦИКЛИНЗАВИСИМОЙ КИНАЗЫ-4 В ПОПУЛЯЦИИ Ki-67-НЕГАТИВНЫХ КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ. Молекулярная медицина, 2022; (6): 39-43https://doi.org/10.29296/24999490-2022-06-06
Список литературы: 
  1. Santos-de-Frutos K., Djouder N. When dormancy fuels tumour relapse. Commun Biol. 2021; 4: 747. DOI: 10.1038/s42003-021-02257-0.
  2. Milanovic M., Fan D.N.Y., Belenki D., Dabritz J.H.M. et al. Senescence-associated reprogramming promotes cancer stemness. Nature. 2018; 553: 96–100. DOI: 10.1038/nature25167.
  3. Angelis M.L.D., Francescangeli F., Torre F. L., Zeuner A. Stem cell plasticity and dormancy in the development of cancer therapy resistance. Front Oncol. 2019; 9: 1–14. DOI: 10.3389/fonc.2019.00626.
  4. Rodgers J.T., King K.Y., Brett J.O., Cromie M.J., Cromie M.J., Charville G.W., Maguire K.K., Brunson C., Mastey N., Liu L., Tsai C.R., Goodell M.A., Rando T.A. mTORC1 controls the adaptive transitionofquiescent stem cells from G0 to Alert. Nature. 2014; 510: 393–6. DOI: 10.1038/nature13255.
  5. Danenberg E., Bardwell H., Zanotelli V.R.T., Provenzano E., Chin S.-F., Runda O.M., Green A., Raksha E., Aparicio S., Ellis I.O., Bodenmiller B., Caldas C., Ali H.R. Breast tumor microenvironment structures are associated with genomic features and clinical outcome. Nat. Genet. 2022; 54 (5): 660–9. DOI: 10.1038/s41588-022-01041-y.
  6. Gao X.-L., Zhang M., Tang Y.-L., Liang X.-H. Cancer cell dormancy: Mechanisms and implications of cancer recurrence and metastasis. OncoTargets Ther. 2017; 10: 5219. DOI: 10.2147/OTT.S140854
  7. Huncharek M., Caubet J.F., McGarry R. Single-agent DTIC versus combination chemotherapy with or without immunotherapy in metastatic melanoma: a meta-analysis of 3273 patients from 20 randomized trials. Melanoma Res. 2001; 11: 75. DOI: 10.1097/00008390-200102000-00009.
  8. Zinchenko I.S., Palkina N.V., Ruksha T.G. MicroRNA profiling in melanoma cells that are resistant to Dacarbazine. Cell and Tissue Biol. 2022; 16 (3): 203–12. DOI: 10.1134/S1990519X22030117.
  9. Roberts P.J., Bisi J.E., Strum J.C., Combest A.J., Darr DB, Usary JE, Zamboni WC, Wong KK, Perou CM, Sharpless NE. Multiple roles of cyclin-dependent kinase 4/6 inhibitors in cancer therapy. J Natl Cancer Inst. 2012; 104 (6): 476–87. DOI: 10.1093/jnci/djs002.
  10. Goel S., DeCristo M.J., Watt A.C., BrinJones H., Sceneay J., Li B.B., Khan N., Ubellacker J.M., Xie S., Metzger-Filho O., Hoog J., Ellis M.J., Ma C.X., Ramm S., Krop I.E., Winer E.P., Roberts T.M., Kim H.J., McAllister S.S., Zhao J.J. CDK4/6 inhibition triggers anti-tumour immunity. Nature. 2017; 24, 548 (7668): 471–5. DOI: 10.1038/nature23465.
  11. Alcazar O., Achberger S., Aldrich W., Hu Z., Negrotto S., Saunthararajah Y., Triozzi P. Epigenetic regulation by decitabine of melanoma differentiation in vitro and in vivo. Int. J. Cancer. 2012; 131: 18. DOI: 10.1002/ijc.26320.