МАКРОФАГАЛЬНАЯ АДСОРБЦИЯ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК КАК ДОКАЗАТЕЛЬСТВО ИХ МИГРАЦИИ ПО СОСУДАМ ПОСЛЕ ТКАНЕВОЙ ИНЪЕКЦИИ

DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2018-04-10

И.В. Майбородин(1), доктор медицинских наук, профессор, Р.В. Маслов(1), кандидат медицинских наук, Т.В. Михеева(1), кандидат медицинских наук, А.А. Еловский(3), Н.Ф. Фигуренко(1), кандидат медицинских наук, В.И. Майбородина(2), доктор медицинских наук, А.И. Шевела(1), доктор медицинских наук, профессор, В.В. Анищенко(3), доктор медицинских наук 1-Центр новых медицинских технологий, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Российская Федерация, 630090, Новосибирск, пр. акад. Лаврентьева, д. 8; 2-Лаборатория ультраструктурных основ патологии, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Институт молекулярной патологии и патоморфологии», Российская Федерация, 630117, Новосибирск, ул. акад. Тимакова, д. 2; 3-АО Медицинский центр «Авиценна», Российская Федерация, 630007, Новосибирск, ул. Урицкого, д. 2 E-mail: imai@mail.ru

Введение. Клеточные технологии демонстрируют определенную эффективность при лечении многих заболеваний. Однако в литературе имеются сообщения о возможности фагоцитоза и лизиса макрофагами введенных в ткани аутологичных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) костномозгового происхождения. Обнаружено также присутствие макрофагов с детритом введенных ММСК в регионарных лимфатических узлах, что может косвенно свидетельствовать о проникновении указанных клеток или их фрагментов в кровеносные или лимфатические сосуды. Цель исследования. Доказать возможность миграции ММСК в сосудистое русло после тканевой инъекции и определить роль макрофагов в элиминации этих клеток из сосудов. Методы. Методом флюоресцентной световой микроскопии изучали состояние у крыс клетчатки и капсулы вокруг паховых лимфатических узлов (ПЛУ) после инъекционного введения через кожу в проекции лигированной бедренной вены ММСК с трансфицированным геном GFP и дополнительно окрашенными Vybrant® CM-Dil мембранами. Результаты. После введения ММСК в ткани как с нарушенным венозным оттоком, так и без изменений тока крови через 2–3 нед рядом с сосудами паранодальной клетчатки и капсулы ПЛУ были найдены макрофаги с мелкими включениями, окрашенными Vybrant® CM-Dil, и с очень интенсивной флюоресценцией при использовании фильтра для родамина. Заключение. ММСК после инъекции в ткани могут частично мигрировать в кровеносное и лимфатическое русло. В результате возможен фагоцитоз из сосудов введенных извне ММСК и их детрита паравазально расположенными макрофагами. Появление макрофагов с детритом ММСК в тканях вокруг ПЛУ на 2–5-й неделе после использования клеточных технологий свидетельствует как о максимуме деструкции у крыс ММСК, так и о наиболее выраженной их элиминации из структур, созданных с их участием, именно к этому сроку.
Ключевые слова: 
мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, распространение стромальных клеток, макрофаги, регионарные лимфатические узлы

Список литературы: 
  1. Varol C., Mildner A., Jung S. Macrophages: development and tissue specialization. Annu Rev. Immunol. 2015; 33: 643–75.
  2. Okabe Y., Medzhitov R. Tissue biology perspective on macrophages. Nat Immunol. 2016; 17 (1): 9–17.
  3. Майбородин И.В., Морозов В.В., Аникеев А.А., Фигуренко Н.Ф., Маслов Р.В., Частикин Г.А., Матвеева В.А., Майбородина В.И. Макрофагальный ответ у крыс на введение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в регион хирургической травмы. Новости хирургии. 2017; 25 (3): 233–41. [Maiborodin I.V., Morozov V.V., Anikeev A.A., Figurenko N.F., Maslov R.V., Chastikin G.A., Matveeva V.A., Maiborodina V.I. Macrophage reaction to multipotent mesenchymal stromal cells introduction into surgical trauma site in rats. Novosti Khirurgii. 2017; 25 (3): 233–41 (in Russian)]
  4. Майбородин И.В., Морозов В.В., Матвеева В.А., Аникеев А.А., Фигуренко Н.Ф., Маслов Р.В., Частикин Г.А., Майбородина В.И. Результаты использования клеточных технологий при лигировании магистральной вены в эксперименте. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2017; 164 (7): 73–80. [Maiborodin I.V., Morozov V.V., Matveeva V.A., Anikeev A.A., Figurenko N.F., Maslov R.V., Chastikin G.A., Maiborodina V.I. Results of experimental ligation of the main vein with the use of cell technologies. Bull Exp. Biol. Med. 2017; 164 (1): 61–7 (in Russian)]
  5. Wu X., Pan L., Wang Z., Liu X., Zhao D., Zhang X., Rupp R.A., Xu J. Ultraviolet irradiation induces autofluorescence enhancement via production of reactive oxygen species and photodecomposition in erythrocytes. Biochem Biophys Res Commun. 2010; 396 (4): 999–1005.
  6. Campo J.J., Aponte J.J., Nhabomba A.J., Sacarlal J., Angulo-Barturen I., Jiménez-Diaz M.B., Alonso P.L., Dobaño C. Feasibility of flow cytometry for measurements of Plasmodium falciparum parasite burden in studies in areas of malaria endemicity by use of bidimensional assessment of YOYO-1 and autofluorescence. J. Clin. Microbiol. 2011; 49 (3): 968–74.
  7. Watson J. Suppressing autofluorescence of erythrocytes. Biotech Histochem. 2011; 86 (3): 207.
  8. Mendes-Jorge L., Ramos D., Luppo M., Llombart C., Alexandre-Pires G., Nacher V., Melgarejo V., Correia M., Navarro M., Carretero A., Tafuro S., Rodriguez-Baeza A., Esperança-Pina J.A., Bosch F., Ruberte J. Scavenger function of resident autofluorescent perivascular macrophages and their contribution to the maintenance of the blood-retinal barrier. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009; 50 (12): 5997–6005.
  9. Mitchell A.J., Pradel L.C., Chasson L., van Rooijen N., Grau G.E., Hunt N.H., Chimini G. Technical advance: autofluorescence as a tool for myeloid cell analysis. J. Leukoc Biol. 2010; 88 (3): 597–603.
  10. Li F., Yang M., Wang L., Williamson I., Tian F., Qin M., Shah P.K., Sharifi B.G. Autofluorescence contributes to false-positive intracellular Foxp3 staining in macrophages: a lesson learned from flow cytometry. J. Immunol. Methods. 2012; 386 (1–2): 101–7.
  11. Lei L., Tzekov R., Tang S., Kaushal S. Accumulation and autofluorescence of phagocytized rod outer segment material in macrophages and microglial cells. Mol Vis. 2012; 18: 103–13.
  12. Luhmann U.F., Robbie S., Munro P.M., Barker S.E., Duran Y., Luong V., Fitzke F.W., Bainbridge J.W., Ali R.R., MacLaren R.E. The drusenlike phenotype in aging Ccl2-knockout mice is caused by an accelerated accumulation of swollen autofluorescent subretinal macrophages. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009; 50 (12): 5934–43.
  13. Mitchell A.J., Pradel L.C., Chasson L., Van Rooijen N., Grau G.E., Hunt N.H., Chimini G. Technical advance: autofluorescence as a tool for myeloid cell analysis. J. Leukoc Biol. 2010; 88 (3): 597–603.
  14. Potter K.A., Simon J.S., Velagapudi B., Capadona J.R. Reduction of autofluorescence at the microelectrode-cortical tissue interface improves antibody detection. J. Neurosci. Methods. 2012; 203 (1): 96–105.
  15. Liu S., Jiang L., Li H., Shi H., Luo H., Zhang Y., Yu C., Jin Y. Mesenchymal stem cells prevent hypertrophic scar formation via inflammatory regulation when undergoing apoptosis. J. Invest Dermatol. 2014; 134 (10): 2648–57.
  16. Yates C.C., Nuschke A., Rodrigues M., Whaley D., Dechant J.J., Taylor D.P., Wells A. Improved transplanted stem cell survival in a polymer gel supplemented with tenascin C accelerates healing and reduces scarring of murine skin wounds. Cell Transplant. 2017; 26 (1): 103–13.
  17. Майбородин И.В., Гаврилин В.Н., Бородин Ю.И., Рейхерт В.Э. Клапаны краевого синуса лимфатических узлов. Морфология. 1996; 110 (6): 86–8. [Maiborodin I.V., Gavrilin V.N., Borodin Iu.I., Reikhert V.E. The valves of the marginal sinus of the lymph nodes. Morfologiia. 1996; 110 (6): 86–8 (in Russian)]